Effects of the novel gene, LAPTM4B, highly expression in hepatocellular carcinoma on cell proliferation and tumorigenesis of NIH3T3 cells

目的:研究在肝细胞癌中高表达的新基因LAPTM4B 对小鼠NIH3T3细胞生物学行为的影响,探讨LAPTM4B基因的生物学功能.方法:构建真核表达质粒pcDNA3-TM4B,利用脂质体稳定转染LAPTM4B cDNA至NIH3T3细胞中,用RT-PCR、Northern和Western杂交法筛选和鉴定转染后LAPTM4B 基因高表达的单克隆细胞株,研究其与细胞增殖相关的生物学特征的变化.结果:与转染空载体的对照组相比,转染了LAPTM4BcDNA的NIH3T3细胞表面发生明显变化,微绒毛的数量和长度增加,多分枝且缠绕成团.转染细胞在纤黏连蛋白、人工基膜和层黏连蛋白基质上的黏附/铺展能力增强.生长曲线显示转染细胞的生长速率增高.流式细胞仪检测显示转染细胞的S期细胞数比未转染细胞显著增多,而G0～G1期细胞数减少.Western杂交显示Cyclin E蛋白在转染细胞中的表达显著增加.转染细胞对血清的依赖性下降并具有成瘤性.结论:LAPTM4B基因能影响细胞增殖的调节,促进NIH3T3细胞的增殖,并使NIH3T3细胞具有成瘤性,在肿瘤发生过程中具有重要的作用.面向21世纪教育振兴行动计划(985计划)中国科学引文数据库(CSCD)04348-3523