目的提取人肝癌细胞系HLE细胞表面抗原多肽并进行初步鉴定.方法应用弱酸洗涤法从HLE细胞表面洗脱出与MHC-I类分子结合的抗原多肽,经低温冷冻干燥浓缩、反相高效液相色谱仪(RP-HPLC)纯化后,用Lowry法进行定量并以基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)对其成分进行初步鉴定.结果应用弱酸洗涤法可从每109个HLE细胞表面提取抗原多肽(52.3±8.6)μg,经HPLC及MALDI-TOF-MS鉴定其中有31种多肽组分.结论使用弱酸洗涤法、低温冷冻干燥以及HPLC方法可以从肝癌细胞表面洗脱并纯化出多种与MHC-I类分子结合的抗原多肽.卫生部部属(管)医疗机构临床学科重点项目; 国家自然科学基金中文核心期刊要目总览(PKU)中国科学引文数据库(CSCD)02117-1192
目的:对HCA518蛋白进行表达和纯化,并制备HCA518蛋白的单克隆抗体.方法:采用基因重组技术在原核系统表达HCA518蛋白,金属镍螯合的Ni-NAT亲和层析柱进行蛋白纯化;杂交瘤技术建立分泌HC...
通过PCR法,将来源于蛇毒蛋白质eristostatin中的一段含有RGD(Arg-Gly-Asp)序列的十三肽(SRVARGDWNDDYS)的基因,以一个无胰岛素活性但保留天然免疫原性的胰岛素原突变...
真核多肽:N-寡糖酶(peptide:N-glycanase或PNGase)可切除错误折叠糖蛋白上的N-寡糖链,并可与内质网关联降解(endoplasmic reticulum-associated ...
被主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ类分子呈递在细胞表面的抗原肽大部分来源于细胞内新合成蛋白质的降解产物,抗原肽直接体现细胞内功能蛋白质的部分变化,蛋白酶体、氨肽酶和抗原转运体(TAP)参与调控抗原肽的...
目的:为诊断戊型肝炎,寻找更好的诊断试剂盒.方法:根据戊型肝炎病毒(HEV)蛋白含有2个可能的抗原表位,从戊型肝炎病毒中国株蛋白的氨基酸序列中选取S30,NS33和S42 3段抗原肽,用固相合成法进行...
目的:研究流感病毒血凝素(HA)308-317变构肽对人类白细胞抗原(HLA)-DR4限制性Ⅱ型胶原(CⅡ)特异性T细胞激活的抑制作用.方法:采用固相法合成3条HA308-317变构肽.流式细胞术分析...
目的 用噬菌体表面展示文库筛选具有人干细胞因子(hSCF)生物学活性的模拟肽.方法 采用酶联免疫吸附测定法(EUSA)从噬菌体环七肽库和十二肽库筛选与重组hSCF受体(rc-kit/Ig1-3)有较...
目的研究人类白细胞抗原(HLA)-DRB1结合性流感病毒血凝素(HA)308-317变构肽在HLA-DR4限制性T细胞激活中的作用.方法采用固相法合成HA308-317原型肽及其变构肽.通过计算机模拟...
肿瘤细胞表面的抗原多肽能够被细胞毒T淋巴细胞特异性识别而引起免疫应答,因此有可能用于研制基于多肽的抗肿瘤疫苗.用弱酸将人肝癌细胞系HLE 细胞表面抗原多肽和人正常肝细胞表面多肽洗脱后,经RP-HPLC...
目的制备及鉴定抗人趋化素样因子1(CKLF1)多克隆抗体,为CKLF1表达和功能研究提供基础.方法利用生物信息学方法分析CKLF1蛋白序列,设计、合成CKLF1羧基端多肽,与钥孔戚血蓝素(KLH)偶联...
目的寻找人膀胱癌P-糖蛋白特异性结合肽. 方法利用表达获得的P-糖蛋白胞外段融合蛋白为靶蛋白,采用酶联板法筛选噬菌体随机12肽库,免疫细胞化学方法进行鉴定. 结果从噬菌体随机肽库中筛选获得与P-糖蛋白...
目的研究Ro52抗原的第119至第264位氨基酸片段(含亮氨酸拉链基序)在抗原表位构成中的作用.方法用PCR法从人类心脏cDNA第一链中扩增编码第¨9至第264位氨基酸的基因片段,定...
目的 建立表达特定免疫球蛋白可变区抗原的人B细胞系.方法 在29例EBV转化B淋巴细胞建立永生化淋巴母细胞系中,PCR-SSP方法检测HLA-A*0201表达的细胞系,将表达HLA-A*0201的细胞...
人白细胞抗原G(HLA-G)是一种在母婴耐受中起主要作用的非经典的HLA-Ⅰ类分子.其中HLA-G3结构简单,仅具有α1结构域、穿膜区及胞浆区,其是否在细胞表面表达尚存在争议.为了建立HLA-G3稳定...
目的:研究P-糖蛋白抗原表位和表达.方法:联合应用多种方法对P-糖蛋白的二级结构和表面特性进行分析,设计了一对引物,PCR扩增产物插入到pGEM-T中,经测序正确后,再克隆入表达载体pGEX-2T,构...
目的:对HCA518蛋白进行表达和纯化,并制备HCA518蛋白的单克隆抗体.方法:采用基因重组技术在原核系统表达HCA518蛋白,金属镍螯合的Ni-NAT亲和层析柱进行蛋白纯化;杂交瘤技术建立分泌HC...
通过PCR法,将来源于蛇毒蛋白质eristostatin中的一段含有RGD(Arg-Gly-Asp)序列的十三肽(SRVARGDWNDDYS)的基因,以一个无胰岛素活性但保留天然免疫原性的胰岛素原突变...
真核多肽:N-寡糖酶(peptide:N-glycanase或PNGase)可切除错误折叠糖蛋白上的N-寡糖链,并可与内质网关联降解(endoplasmic reticulum-associated ...
被主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ类分子呈递在细胞表面的抗原肽大部分来源于细胞内新合成蛋白质的降解产物,抗原肽直接体现细胞内功能蛋白质的部分变化,蛋白酶体、氨肽酶和抗原转运体(TAP)参与调控抗原肽的...
目的:为诊断戊型肝炎,寻找更好的诊断试剂盒.方法:根据戊型肝炎病毒(HEV)蛋白含有2个可能的抗原表位,从戊型肝炎病毒中国株蛋白的氨基酸序列中选取S30,NS33和S42 3段抗原肽,用固相合成法进行...
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目的制备及鉴定抗人趋化素样因子1(CKLF1)多克隆抗体,为CKLF1表达和功能研究提供基础.方法利用生物信息学方法分析CKLF1蛋白序列,设计、合成CKLF1羧基端多肽,与钥孔戚血蓝素(KLH)偶联...
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目的 建立表达特定免疫球蛋白可变区抗原的人B细胞系.方法 在29例EBV转化B淋巴细胞建立永生化淋巴母细胞系中,PCR-SSP方法检测HLA-A*0201表达的细胞系,将表达HLA-A*0201的细胞...
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目的:研究P-糖蛋白抗原表位和表达.方法:联合应用多种方法对P-糖蛋白的二级结构和表面特性进行分析,设计了一对引物,PCR扩增产物插入到pGEM-T中,经测序正确后,再克隆入表达载体pGEX-2T,构...
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真核多肽:N-寡糖酶(peptide:N-glycanase或PNGase)可切除错误折叠糖蛋白上的N-寡糖链,并可与内质网关联降解(endoplasmic reticulum-associated ...