目的构建人Ro60 cDNA的杆状病毒表达载体.方法采用逆转录-PCR技术从Hela细胞RNA中扩增Ro60 cDNA,定向插入杆状病毒转移载体pFastBac HTc,转化大肠杆菌DH10 Bac进行转座,提取重组Bacmid,通过蓝白斑筛选和PCR进行鉴定.结果成功从Hela细胞RNA中扩增出1.56kb Ro60,所克隆的Ro60 cDNA与已公布的序列完全符合,证明本克隆为Ro60 cDNA的精确拷贝,并证实其目的基因与重组载体发生了特异转座和病毒重组,成功地构建了重组杆状病毒表达载体Bacmid-Ro60.结论本实验成功克隆了Ro60 cDNA并构建了其杆状病毒表达载体,为进一步表达Ro60蛋白和研究此抗原在红斑狼疮的发病机制奠定了基础.国家自然科学基金中文核心期刊要目总览(PKU)中国科学引文数据库(CSCD)02105-1083
目的构建一种肝癌细胞靶向性的腺相关病毒载体以用于肝癌的促凋亡基因治疗的研究.方法通过设计含有特定酶切位点的引物,选择性地从人基因组中扩增出人甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)启动子序列并克...
目的:克隆了一个未知功能的人类新基因RNF122,分析了它的表达谱和细胞定位,为其功能研究提供基础.方法:利用Refseq数据库的序列资料,从人混合组织文库中通过PCR和DNA测序克隆了全长的RNF1...
为了获取全长的小分子G-蛋白Rab3a,以用于研究R ab3a与其他蛋白相互作用关系,本实验以人胎盘总c DNA为模板,PCR扩增到人Rab3a cDNA 全编码区.产物回收后克隆于质粒pYESTrp...
目的利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,构建乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原基因的重组杆状病毒.方法构建含有HBV S基因的表达截体pFBDHTa-S,转化DH10Bac感受态菌.利用其含有的细菌...
目的:构建趋化因子受体CXCR4反义 RNA真核表达载体并获取重组假病毒颗粒以用于抗HIV-1研究.方法:用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononucle...
目的:构建人β2-microglobulin(β2-M)基因的原核表达载体,在大肠杆菌中高效表达β2-M蛋白质并进行纯化,为构建MHC-肽四聚体奠定基础.方法:从人外周血单核细胞中提取总RNA,采用R...
目的构建趋化因子受体CCR5反义RNA真核表达载体并获取重组假病毒颗粒以用于抗HIV-1研究.方法用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞(PBMCs)中获得趋化因子受体CCR5翻译起始区的基因片段,...
目的:制备免疫基因修饰的卵巢癌肿瘤疫苗.方法:利用口蹄疫病毒的内在性核糖体插入位点(internal ribosome entry sites,IRES),通过基因克隆技术构建人B7-1、IFN-γ双...
该文对人乳头瘤病毒(HPV)DNA检测如何进入宫颈癌筛查领域以及在该领域应用的发展前景进行综述。HPV检测可以对意义不明非典型鳞状上皮细胞(ASC-US)及以上的患者进行分流检测,亦可与细胞学联合对3...
为了构建结核分支杆菌MTB41 DNA疫苗,同时将其克隆到原核表达载体中进行表达.用结核分支杆菌H37RV株基因组DNA为模板,用PCR法对基因MTB41进行扩增,克隆到真核表达载体pJW4303中,...
目的：体外克隆表达并纯化C7orf69重组蛋白，对C7orf69蛋白进行生物信息学分析。方法 PCR扩增C7orf69目的基因片段，构建原核表达载体，转化BL21，IPTG诱导目的蛋白表达，SDS-P...
目的构建恶性疟原虫海南株(FCC1/HN)CSP3′末端基因的原核表达载体,并对CSP3′末端基因进行序列测定.方法根据恶性疟原虫CSP编码的基因序列设计引物,采用PCR技术扩增出CSP3′末端基因,...
通过检索GenBank的表达序列标签(EST)数据库并结合cDNA末端快速扩增法(RACE)，从小鼠胸腺克隆到一个新的cDNA序列，并从人类肝癌组织中克隆出了其同源cDNA.根据读码框架分析，这两个c...
目的:构建核因子-κB(NF-κB)p65特异性小干涉核糖核酸(small interference RNA,siRNA)重组腺病毒载体.方法:设计特异性NF-κBp65 siRNA的靶序列对应的双链...
目的构建趋化因子受体CCR5反义RNA真核表达载体以用于抗HIV-1的研究.方法用RT-PCR从健康人外周血单个核细胞(PBMCs)中获得趋化因子受体CCR5翻译起始区的基因片段,用基因重组技术将此目...
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为了获取全长的小分子G-蛋白Rab3a,以用于研究R ab3a与其他蛋白相互作用关系,本实验以人胎盘总c DNA为模板,PCR扩增到人Rab3a cDNA 全编码区.产物回收后克隆于质粒pYESTrp...
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为了获取全长的小分子G-蛋白Rab3a,以用于研究R ab3a与其他蛋白相互作用关系,本实验以人胎盘总c DNA为模板,PCR扩增到人Rab3a cDNA 全编码区.产物回收后克隆于质粒pYESTrp...
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