Construction of pGEX4T-1-Cox7a2 and Expression, Purification and Identification of the Recombinant Protein
- 陈亮
- 辛钟成
- 姜学军
- 田龙
- 袁亦铭
- 刘刚
- 宋卫东
- 郭应禄
Publication date
January 2006
DOI Publisher
中华男科学杂志 Journal
issn:1009-3591Abstract
目的:从原代培养的小鼠睾丸Leydig细胞中克隆Cox7a2基因,构建Pgex4t-1-Cox7a2载体,表达和鉴定重组蛋白.方法:应用RT-PCR方法从原代培养的小鼠睾丸Leydig细胞中克隆Cox7a2,利用BamH I和EcoR I酶切位点把Cox7a2克隆到pGEX4T-1载体,酶切和测序鉴定后,诱导重组蛋白的表达,进行纯化后,利用蛋白免疫印迹进行鉴定.结果:从原代培养的小鼠睾丸Leydig细胞克隆到Cox7a2完整的编码序列,构建了pGEX4T-1-Cox7a2载体,表达了预期相对分子质量的融合蛋白,并经免疫印迹检测鉴定.结论:成功克隆Cox7a2,表达纯化了其融合蛋白,为基因的功能研究奠定了前期基础.国家211工程项目09794-7971
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