目的:构建嵌合型抗人膀胱癌抗体的真核表达载体,并实现其真核表达.方法:从杂交瘤细胞中克隆得到鼠源单抗的可变区基因,插入嵌合抗体IgG1真核表达载体pDHL中,转染 CHO细胞,实现其真核表达,并对抗人膀胱癌人-鼠嵌合抗体的功能进行初步鉴定.结果:成功构建抗人膀胱癌人-鼠嵌合抗体真核表达载体,并实现其真核表达. 初步的功能鉴定表明抗人膀胱癌人-鼠嵌合抗体具有较好的特异性和亲合力.结论 :构建的抗人膀胱癌人-鼠嵌合抗体真核表达载体在真核细胞内得到表达 ,且其功能较为理想.中国科学引文数据库(CSCD)05402-4063
目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)结构蛋白的真核表达载体.方法:用RT-PCR方法扩增HCV结构基因,并将其克隆入真核表达载体pcDNA3中,用磷酸钙转染法将其转入Sp2/0细胞,用免疫组化法检测细胞中...
目的构建人Ro60 cDNA的杆状病毒表达载体.方法采用逆转录-PCR技术从Hela细胞RNA中扩增Ro60 cDNA,定向插入杆状病毒转移载体pFastBac HTc,转化大肠杆菌DH10 Bac进...
目的:构建抗卵巢癌单链抗体183B2ScFv 与假单孢外毒素(peudononas exotoxin, PE38)的融合蛋白表达载体并制备抗人卵巢癌单链免疫毒素蛋白183B2ScFvPE38,为卵巢癌...
目的:克隆抗膀胱癌单抗BDI的Fab段基因并在大肠杆菌中表达.方法:用逆转录-聚合酶链反应技术(RT PCR),从分泌抗人膀胱癌的鼠单抗杂交瘤细胞系中克隆K链和Fd段基因,克隆到Fab表达载体中,在大...
目的鉴定抗人膀胱癌人-鼠嵌合抗体ch-BDI在荷瘤鼠体内外功能,探讨其临床应用价值. 方法通过超滤浓缩和亲合层析,得到较高纯度的ch-BDI,用还原法标记99mTc,体外测定了其对人膀胱癌细胞的结合能...
目的为膀胱癌的导向诊断和治疗提供免疫原性更低的单链抗体. 方法从1株分泌鼠抗人膀胱癌单克隆抗体的杂交瘤细胞株BDI-1中分离出总RNA,逆转录cDNA,并以此为模板用聚合酶链反应技术扩增VH和VL基因...
目的:研究膀胱移行细胞癌(TCC)中黑色素瘤抗原(MAGE)基因表达.方法:逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测20例膀胱TCC患者癌组织和3株膀胱TCC细胞株T24、EJ、BIU87中MAGE...
目的:构建可在真核细胞内表达人肿瘤坏死因子alpha(hTNF-α)基因的真核表达载体.方法:应用RT-PCR的方法从足月妊高征患者的胎盘组织中,扩增出hTNF-αcDNA,连接至载体pMD18-Tv...
目的构建含鼠单抗CDR3的人源噬菌体抗体库,对膀胱癌鼠单抗进行人源化. 方法通过重叠PCR及DNA重组技术,将抗膀胱癌鼠单抗BDI的CDR3区与人淋巴细胞来源的多样化的VH和Vκ组合,构建含BDI C...
目的 比较人表浅性与浸润性膀胱癌基因表达谱的差异.方法 应用基因芯片技术对表浅性膀胱癌和浸润性膀胱癌的RNA进行检测分析.得到芯片灰度扫描图,通过图像处理软件GenePix Pro 3.0对图像进行分...
目的:克隆小鼠雄激素受体(androgen receptor,AR)基因的cDNA,构建AR真核表达载体,并在睾丸支持细胞TM4中进行表达和鉴定.方法:应用RT-PCR法从小鼠睾丸中扩增AR,将测序正...
目的 构建小鼠雄激素受体(androgen receptor,AR)基因真核表达载体,转染TM4细胞,建立稳定转染AR的TM4细胞系.方法 应用RT-PCR方法从小鼠睾丸中扩增AR,将测序正确的PCR...
目的:研究膀胱移行细胞癌中Uroplakin的表达,探讨它与肿瘤分级的关系.方法:选取96例膀胱移行细胞癌标本,应用免疫组织化学染色方法进行检测.结果:96例膀胱肿瘤标本中,75例Uroplakin表...
对3D5卵巢癌抗独特型单链抗体进行原核系统的高效表达.采用DNA重组技术,将3D5ScFv克隆到原核表达载体pTMF中,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3);IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定蛋...
目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)全长cDNA及其胞外区真核表达产物体外诱导肿瘤细胞的凋亡作用，为TRAIL基因治疗提供实验依据。方法从胎心cDNA文库中经PCR扩增获得两种形式cDN...
目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)结构蛋白的真核表达载体.方法:用RT-PCR方法扩增HCV结构基因,并将其克隆入真核表达载体pcDNA3中,用磷酸钙转染法将其转入Sp2/0细胞,用免疫组化法检测细胞中...
目的构建人Ro60 cDNA的杆状病毒表达载体.方法采用逆转录-PCR技术从Hela细胞RNA中扩增Ro60 cDNA,定向插入杆状病毒转移载体pFastBac HTc,转化大肠杆菌DH10 Bac进...
目的:构建抗卵巢癌单链抗体183B2ScFv 与假单孢外毒素(peudononas exotoxin, PE38)的融合蛋白表达载体并制备抗人卵巢癌单链免疫毒素蛋白183B2ScFvPE38,为卵巢癌...
目的:克隆抗膀胱癌单抗BDI的Fab段基因并在大肠杆菌中表达.方法:用逆转录-聚合酶链反应技术(RT PCR),从分泌抗人膀胱癌的鼠单抗杂交瘤细胞系中克隆K链和Fd段基因,克隆到Fab表达载体中,在大...
目的鉴定抗人膀胱癌人-鼠嵌合抗体ch-BDI在荷瘤鼠体内外功能,探讨其临床应用价值. 方法通过超滤浓缩和亲合层析,得到较高纯度的ch-BDI,用还原法标记99mTc,体外测定了其对人膀胱癌细胞的结合能...
目的为膀胱癌的导向诊断和治疗提供免疫原性更低的单链抗体. 方法从1株分泌鼠抗人膀胱癌单克隆抗体的杂交瘤细胞株BDI-1中分离出总RNA,逆转录cDNA,并以此为模板用聚合酶链反应技术扩增VH和VL基因...
目的:研究膀胱移行细胞癌(TCC)中黑色素瘤抗原(MAGE)基因表达.方法:逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测20例膀胱TCC患者癌组织和3株膀胱TCC细胞株T24、EJ、BIU87中MAGE...
目的:构建可在真核细胞内表达人肿瘤坏死因子alpha(hTNF-α)基因的真核表达载体.方法:应用RT-PCR的方法从足月妊高征患者的胎盘组织中,扩增出hTNF-αcDNA,连接至载体pMD18-Tv...
目的构建含鼠单抗CDR3的人源噬菌体抗体库,对膀胱癌鼠单抗进行人源化. 方法通过重叠PCR及DNA重组技术,将抗膀胱癌鼠单抗BDI的CDR3区与人淋巴细胞来源的多样化的VH和Vκ组合,构建含BDI C...
目的 比较人表浅性与浸润性膀胱癌基因表达谱的差异.方法 应用基因芯片技术对表浅性膀胱癌和浸润性膀胱癌的RNA进行检测分析.得到芯片灰度扫描图,通过图像处理软件GenePix Pro 3.0对图像进行分...
目的:克隆小鼠雄激素受体(androgen receptor,AR)基因的cDNA,构建AR真核表达载体,并在睾丸支持细胞TM4中进行表达和鉴定.方法:应用RT-PCR法从小鼠睾丸中扩增AR,将测序正...
目的 构建小鼠雄激素受体(androgen receptor,AR)基因真核表达载体,转染TM4细胞,建立稳定转染AR的TM4细胞系.方法 应用RT-PCR方法从小鼠睾丸中扩增AR,将测序正确的PCR...
目的:研究膀胱移行细胞癌中Uroplakin的表达,探讨它与肿瘤分级的关系.方法:选取96例膀胱移行细胞癌标本,应用免疫组织化学染色方法进行检测.结果:96例膀胱肿瘤标本中,75例Uroplakin表...
对3D5卵巢癌抗独特型单链抗体进行原核系统的高效表达.采用DNA重组技术,将3D5ScFv克隆到原核表达载体pTMF中,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3);IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定蛋...
目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)全长cDNA及其胞外区真核表达产物体外诱导肿瘤细胞的凋亡作用，为TRAIL基因治疗提供实验依据。方法从胎心cDNA文库中经PCR扩增获得两种形式cDN...
目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)结构蛋白的真核表达载体.方法:用RT-PCR方法扩增HCV结构基因,并将其克隆入真核表达载体pcDNA3中,用磷酸钙转染法将其转入Sp2/0细胞,用免疫组化法检测细胞中...
目的构建人Ro60 cDNA的杆状病毒表达载体.方法采用逆转录-PCR技术从Hela细胞RNA中扩增Ro60 cDNA,定向插入杆状病毒转移载体pFastBac HTc,转化大肠杆菌DH10 Bac进...
目的:构建抗卵巢癌单链抗体183B2ScFv 与假单孢外毒素(peudononas exotoxin, PE38)的融合蛋白表达载体并制备抗人卵巢癌单链免疫毒素蛋白183B2ScFvPE38,为卵巢癌...
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