CIK cells acquired multidrug resistance and maintained cytotoxic activity to tumor cells after mdr1 gene transfection

目的将多药耐药基因(mdr1)转入细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞,观察其是否产生耐药性并且保持肿瘤杀伤活性.方法用IFN-γ, CD3单抗, IL-2, IL-1等细胞因子体外诱导外周血单个核细胞获得CIK细胞.采用电穿孔方法将mdr1基因表达质粒pHamdr转入CIK细胞.转染后72 h提取细胞总RNA,DNA酶消化残留质粒DNA后进行RT-PCR,鉴定mdr1基因表达;流式细胞仪检测细胞膜耐药蛋白(P-gp)表达.四唑蓝比色法(MTT)检测转基因后CIK细胞对阿霉素和秋水仙碱的耐药性;同时检测转染前后CIK细胞对MCF7细胞(人类乳腺癌细胞系)的杀伤活性变化.结果转染mdr1后的CIK细胞mdr1 mRNA阳性,P-gp阳性的CIK细胞为21%～37%(平均27%).转染后CIK细胞获得了多药耐药性,对阿霉素的IC50值较转染前升高了22.3～45.8倍,对秋水仙碱的IC50值升高了6.7～11.35倍.转染前后CIK细胞对MCF7肿瘤细胞的杀伤活性无明显变化(P>0.05).结论 CIK细胞转入mdr1基因后获得了多药耐药性,转染后的CIK细胞仍然保持原有的肿瘤细胞杀伤活性.国家自然科学基金; 北京市自然科学基金中文核心期刊要目总览(PKU)中国科学引文数据库(CSCD)012617-6202