Add to ORKG目的:构建核因子-κB(NF-κB)p65特异性小干涉核糖核酸(small interference RNA,siRNA)重组腺病毒载体.方法:设计特异性NF-κBp65 siRNA的靶序列对应的双链DNA,插入腺病毒穿梭质粒,然后跟腺病毒骨架质粒共转染HEK-293A细胞,穿梭质粒和骨架质粒在细胞内整合包装重组腺病毒并用β-Gal染色鉴定.重组腺病毒扩增、纯化、滴度测定后,感染培养的大鼠关节软骨细胞,应用RT-PCR在mRNA水平观察NF-κBp65的表达.结果:β-Gal染色显示重组腺病毒载体构建成功,RT-PCR结果显示重组腺病毒有效抑制了目的基因NF-κBp65的表达.结论:特异性NF-κBp65 siRNA的重组腺病载体可以抑制目的基因的表达,可以用于体内抑制骨关节炎的实验研究.国家自然科学基金资助项目中文核心期刊要目总览(PKU)中国科技核心期刊(ISTIC)中国科学引文数据库(CSCD)06647-6502
目的构建一种肝癌细胞靶向性的腺相关病毒载体以用于肝癌的促凋亡基因治疗的研究.方法通过设计含有特定酶切位点的引物,选择性地从人基因组中扩增出人甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)启动子序列并克...
目的:构建含12密码子点突变的K-ras基因siRNA腺病毒载体,并研究其对人肺腺癌细胞株H441中突变K-ras基因表达的影响.方法:首先构建含有K-rasV12 siRNA的人H1启动子真核表达载...
本文用温和的选择性细胞抽提技术,提取腺病毒(adenovirus)感染6h的Hela细胞核内各种DNA组分,分别以腺病毒DNA的早期转录区(El_a,El_b)与晚期转录区(L_2)作探针进行Sout...
目的:探讨人磷酸二脂酶5(PDE5)基因反义RNA重组腺病毒载体的构建方法.方法:根据基因库确定具有完整PDE5A1启动子活性的cDNA基因序列,并设计反义链,两端加内切酶修饰;通过转载体克隆方法构建...
目的 构建含有人E2F2基因和绿色荧光蛋白基因(pEGFP)的腺病毒载体,为聋病的基因治疗奠定实验基础.方法 根据已知的E2F2基因序列设计并合成相应的双链DNA,将其与酶切线性化的pDC315-EG...
目的构建趋化因子受体CCR5反义核糖核酸(RNA)重组载体并获取重组腺病毒,用于抗艾滋病病毒1型(HIV-1)基因治疗研究.方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法,从健康人外周血单核细胞中扩增出...
目的构建尤文肉瘤融合基因EWS-FLI1重组腺病毒,并检测其在外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,为进一步进行尤文肉瘤的免疫治疗奠定基础.方法将质粒pEC1 EWS/FLI1酶切,切出的EWS-FL...
目的:构建趋化因子受体CCR5,CXCR4双靶区反义RNA重组载体并获取重组腺病毒以用于抗HIV-1基因治疗的研究.方法:用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞中分别扩增出趋化因子受体CCR5,CX...
利用RT-PCR法,从人胰腺组织扩增出SNAP25基因,定向克隆至pENTR-TOPO载体获得重组质粒pENTR/D-TOPO-SNAP25.经PCR及测序验证其阅读框正确.再与腺病毒载体pAD/CM...
目的构建趋化因子受体CCR5反义RNA真核表达载体并获取重组假病毒颗粒以用于抗HIV-1研究.方法用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞(PBMCs)中获得趋化因子受体CCR5翻译起始区的基因片段,...
目的: 通过同源重组构建CTLA4Ig腺病毒载体, 研究其生物学活性, 并用于基因治疗诱导心脏移植耐受.方法: 通过基因重组技术, 将CTLA4Ig基因克隆至腺病毒穿梭质粒pCA13中. 然后将该质粒...
目的构建趋化因子受体CCR5反义RNA真核表达载体以用于抗HIV-1的研究.方法用RT-PCR从健康人外周血单个核细胞(PBMCs)中获得趋化因子受体CCR5翻译起始区的基因片段,用基因重组技术将此目...
目的:构建尤文肉瘤融合基因EWS-FLI1重组腺病毒,利用此腺病毒感染外周血单核细胞(PBMC),培养树突细胞(DC),检测感染后的DC致敏的淋巴细胞对尤文肉瘤细胞系的杀伤作用.方法:将质粒Pec1/...
目的:构建趋化因子受体CXCR4反义 RNA真核表达载体并获取重组假病毒颗粒以用于抗HIV-1研究.方法:用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononucle...
目的 利用AdMaxTM腺病毒载体系统,构建大鼠降钙素基因相关肽(CGRP)基因重组腺病毒载体,包装重组腺病毒并鉴定.方法 根据Genbank提供的大鼠CGRP序列信息(NM_001033956.1)...
目的构建一种肝癌细胞靶向性的腺相关病毒载体以用于肝癌的促凋亡基因治疗的研究.方法通过设计含有特定酶切位点的引物,选择性地从人基因组中扩增出人甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)启动子序列并克...
目的:构建含12密码子点突变的K-ras基因siRNA腺病毒载体,并研究其对人肺腺癌细胞株H441中突变K-ras基因表达的影响.方法:首先构建含有K-rasV12 siRNA的人H1启动子真核表达载...
本文用温和的选择性细胞抽提技术,提取腺病毒(adenovirus)感染6h的Hela细胞核内各种DNA组分,分别以腺病毒DNA的早期转录区(El_a,El_b)与晚期转录区(L_2)作探针进行Sout...
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目的:构建尤文肉瘤融合基因EWS-FLI1重组腺病毒,利用此腺病毒感染外周血单核细胞(PBMC),培养树突细胞(DC),检测感染后的DC致敏的淋巴细胞对尤文肉瘤细胞系的杀伤作用.方法:将质粒Pec1/...
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目的 利用AdMaxTM腺病毒载体系统,构建大鼠降钙素基因相关肽(CGRP)基因重组腺病毒载体,包装重组腺病毒并鉴定.方法 根据Genbank提供的大鼠CGRP序列信息(NM_001033956.1)...
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