Effect of 5-Aza-CdR on methylation and mRNA expression of RASSF1A gene in nasopharyngeal carcinoma cells

目的:研究5氮杂脱氧胞苷对鼻咽癌CNE2细胞中RASSF1A基因甲基化和mRNA表达的影响.方法:用不同浓度(0、5、10、20μmol/L)5氮杂脱氧胞苷处理CNE2细胞,采用甲基化特异性PCR (MSP)法对处理后细胞中RASSF1A基因甲基化状态进行检测；并用SYBR Green qReal Time-PCR法检测RASSF1A mRNA的表达.结果:阴性对照组CNE2细胞中,RASSF1A基因呈完全甲基化状态,当用5μmol/L 5氮杂脱氧胞苷处理后,CNE2细胞出现非甲基化产物,20μmol/L5氮杂脱氧胞苷处理后,CNE2细胞甲基化状态完全被逆转,均为非甲基化产物.阴性对照组CNE2细胞RASSF1A基因呈低表达,经5～20μmol/L 5氮杂脱氧胞苷处理后,RASSF1A mRNA的相对表达量逐渐增加,10和20μmol/L 5氮杂脱氧胞苷处理组,RASSF1A mRNA表达水平均明显高于阴性对照组(P＜0.01)；且20μmol/L理组明显高于5μmol/L处理组(P＜0.01).结论:CNE2细胞ASSF1A基因甲基化可以被5氮杂脱氧胞苷逆转,且5氮杂脱氧胞苷可促进RASSF1A mRNA的表达.深圳市科技研发资金基础研究计划项目; 广东省医学科研基金03179-1822