Differentiation of human umbilical cord blood CD34+ cells into hepatocyte in vitro

目的探讨在体外培养条件下人脐血CD34+细胞向肝细胞的分化.方法用磁性细胞分选试剂盒(MACS)分离出CD34+细胞后在含50 mL/LFBS,1×ITS,4.7 mg/L亚油酸,10-4mol/L2-磷酸抗坏血酸的低糖型DMEM中培养,并以FGF4(100μg/L)、HGF(20μg/L)进行诱导.分别于生长因子刺激前和刺激8、16 d时留取细胞.通过RT-PCR对ALB、AFP、GATA-4等mRNA的表达水平进行检测;用免疫细胞化学染色检测ALB蛋白的表达,并收集培养液测定ALB的质量浓度.结果流式细胞仪检测结果显示CD34+细胞的平均分离纯度＞90%,达到分离要求.RT-PCR检测到诱导后的CD34+细胞表达ALB、AFP、GATA4 mRNA.免疫细胞化学染色可见诱导16 d的CD34+细胞出现ALB阳性表达细胞,ELISA检测表明诱导组8、16 d培养液中的ALB质量浓度明显增高,与诱导前和未诱导组相比均有显著差异(P＜0.01).结论在体外培养条件下,脐血CD34+造血干细胞可分化为表达白蛋白的类肝细胞.广东省深圳市科技计划中国科学引文数据库(CSCD)02143-1462