Application of a Gel Chromatography Renaturing Way on Low Molecular Single-chain Urokinase Mutant(DscuPA-32K)

将构建的一种具溶栓和抗栓双重功能尿激酶原突变体(DscuPA-32K)基因,在大肠杆菌中进行表达.由于DscuPA-32K分子较大并且表达量较高,目的蛋白质基本以包涵体的形式存在.包涵体中的蛋白质是无活性的蛋白质,为了获得有活性的蛋白质,就需要对包涵体进行变性及复性.尝试了一种新的凝胶色谱柱复性方法,并通过柱复性方法与常规的稀释复性方法进行了比较,发现柱复性方法明显优于稀释复性方法,具有成本低,效率高,并对目的蛋白质(DscuPA-32K)进行了初步纯化等优点,尤其对酶这一类容易失活降解的蛋白质进行复性时,很值得进行推广应用.国家高技术研究发展计划(863计划)PubMed中文核心期刊要目总览(PKU)中国科学引文数据库(CSCD)03300-3031