目的:包装携带人白细胞介素12(IL-12)的逆转录病毒,用于宫颈癌的治疗研究.方法:携带IL-12的逆转录病毒重组质粒pL35P40SN经PA317细胞包装,G418筛选.在NIH3T3细胞进行病毒滴度测定.然后用病毒感染人宫颈癌细胞HeLa.PCR、RT-PCR方法检测IL-12基因在HeLa中的整合和表达情况.结果:重组质粒pL35P40SN经PA317细胞包装后收获病毒上清,感染HeLa细胞,检测发现IL-12基因整合到细胞基因组DNA中,并且能有效的转录.结论:成功包装了携带IL-12基因的逆转录病毒,该病毒能有效感染HeLa细胞,并使携带的基因IL-12在细胞中表达,为今后IL-12基因治疗宫颈癌的研究奠定基础.中国博士后科学基金; 广东药学院博士启动基金中国科技核心期刊(ISTIC)071205-12071
目的 构建携带人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的重组慢病毒载体,并鉴定其在HeLa细胞中的表达.方法 采用Gateway技术使克隆载体pENTR221-hTERT与慢病毒表达载体pLenti6.3/...
目的:构建人端粒酶逆转录酶组分(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)反义cDNA逆转录病毒载体,观察其对大肠癌细胞HT29端粒酶活性和细胞增殖的抑...
本研究旨在构建ha1基因慢病毒载体并获得稳定的产毒细胞,为进一步研究异基因造血干细胞移植后ha1介导的GVHD和GVL的分离机制奠定基础.将已构建好的T-ha1质粒酶切获得目的基因后,将目的基因定向克...
目的:建立逆转录病毒介导的人IL-1Ra体外表达体系.方法:应用DNA重组技术,将人IL-1Ra cDNA片段重组到逆转录病毒质粒pLXRN中,经PT67细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染原代关节滑...
目的:将小鼠Aire基因定向连入MigR1-GFP质粒,得到长期稳定的Aire逆转录病毒表达载体,收集逆转录病毒上清感染胸腺基质细胞,为研究Aire在胸腺细胞终末分化中的作用奠定基础.方法:以小鼠胸腺...
构建在真核细胞内转录表达乙型肝炎病毒(HBV)双靶区反义核酸重组载体用以抗HBV基因治疗的研究.方法为合成互补于HBV(ayw亚型)X区核苷酸X片段以及互补于HBV P区的P片段,利用基因重组技术将X...
目的:构建趋化因子受体CXCR4反义 RNA真核表达载体并获取重组假病毒颗粒以用于抗HIV-1研究.方法:用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononucle...
目的:构建可在真核细胞内表达人肿瘤坏死因子alpha(hTNF-α)基因的真核表达载体.方法:应用RT-PCR的方法从足月妊高征患者的胎盘组织中,扩增出hTNF-αcDNA,连接至载体pMD18-Tv...
目的构建趋化因子受体CCR5反义RNA真核表达载体并获取重组假病毒颗粒以用于抗HIV-1研究.方法用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞(PBMCs)中获得趋化因子受体CCR5翻译起始区的基因片段,...
目的:构建针对TERF2IP1基因的短发夹RNA (shRNA)表达载体,在HCT116细胞中鉴定该载体对TERF2IP1基因的干扰效果.方法:设计针对TERF2IP1基因的shRNA序列,将其克隆至...
目的 构建含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的睾丸特异性新基因T490超表达质粒pDT490-EGFP,检测其在Hela细胞中的表达情况.方法 采用RT-PCR的方法从成年Balb/c小鼠睾丸...
目的构建趋化因子受体CCR5反义RNA真核表达载体以用于抗HIV-1的研究.方法用RT-PCR从健康人外周血单个核细胞(PBMCs)中获得趋化因子受体CCR5翻译起始区的基因片段,用基因重组技术将此目...
目的构建尤文肉瘤融合基因EWS-FLI1重组腺病毒,并检测其在外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,为进一步进行尤文肉瘤的免疫治疗奠定基础.方法将质粒pEC1 EWS/FLI1酶切,切出的EWS-FL...
目的构建载有白细胞介素-10(IL-10)基因的,能在肝星状细胞(HSC)稳定表达的重组腺病毒载体,为将来的肝纤维化基因治疗提供基础.方法将IL-10cDNA克隆于腺病毒穿梭质粒PAdTrack-CM...
目的:建立小鼠Stra8基因启动子控制绿色荧光蛋白EGFP表达(P(stra8)-EGFP)的逆转录病毒包装细胞株,以方便地将P(stra8)-EGFP转导到目的细胞,为生殖细胞鉴定分选提供基础.方法...
目的 构建携带人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的重组慢病毒载体,并鉴定其在HeLa细胞中的表达.方法 采用Gateway技术使克隆载体pENTR221-hTERT与慢病毒表达载体pLenti6.3/...
目的:构建人端粒酶逆转录酶组分(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)反义cDNA逆转录病毒载体,观察其对大肠癌细胞HT29端粒酶活性和细胞增殖的抑...
本研究旨在构建ha1基因慢病毒载体并获得稳定的产毒细胞,为进一步研究异基因造血干细胞移植后ha1介导的GVHD和GVL的分离机制奠定基础.将已构建好的T-ha1质粒酶切获得目的基因后,将目的基因定向克...
目的:建立逆转录病毒介导的人IL-1Ra体外表达体系.方法:应用DNA重组技术,将人IL-1Ra cDNA片段重组到逆转录病毒质粒pLXRN中,经PT67细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染原代关节滑...
目的:将小鼠Aire基因定向连入MigR1-GFP质粒,得到长期稳定的Aire逆转录病毒表达载体,收集逆转录病毒上清感染胸腺基质细胞,为研究Aire在胸腺细胞终末分化中的作用奠定基础.方法:以小鼠胸腺...
构建在真核细胞内转录表达乙型肝炎病毒(HBV)双靶区反义核酸重组载体用以抗HBV基因治疗的研究.方法为合成互补于HBV(ayw亚型)X区核苷酸X片段以及互补于HBV P区的P片段,利用基因重组技术将X...
目的:构建趋化因子受体CXCR4反义 RNA真核表达载体并获取重组假病毒颗粒以用于抗HIV-1研究.方法:用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononucle...
目的:构建可在真核细胞内表达人肿瘤坏死因子alpha(hTNF-α)基因的真核表达载体.方法:应用RT-PCR的方法从足月妊高征患者的胎盘组织中,扩增出hTNF-αcDNA,连接至载体pMD18-Tv...
目的构建趋化因子受体CCR5反义RNA真核表达载体并获取重组假病毒颗粒以用于抗HIV-1研究.方法用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞(PBMCs)中获得趋化因子受体CCR5翻译起始区的基因片段,...
目的:构建针对TERF2IP1基因的短发夹RNA (shRNA)表达载体,在HCT116细胞中鉴定该载体对TERF2IP1基因的干扰效果.方法:设计针对TERF2IP1基因的shRNA序列,将其克隆至...
目的 构建含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的睾丸特异性新基因T490超表达质粒pDT490-EGFP,检测其在Hela细胞中的表达情况.方法 采用RT-PCR的方法从成年Balb/c小鼠睾丸...
目的构建趋化因子受体CCR5反义RNA真核表达载体以用于抗HIV-1的研究.方法用RT-PCR从健康人外周血单个核细胞(PBMCs)中获得趋化因子受体CCR5翻译起始区的基因片段,用基因重组技术将此目...
目的构建尤文肉瘤融合基因EWS-FLI1重组腺病毒,并检测其在外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,为进一步进行尤文肉瘤的免疫治疗奠定基础.方法将质粒pEC1 EWS/FLI1酶切,切出的EWS-FL...
目的构建载有白细胞介素-10(IL-10)基因的,能在肝星状细胞(HSC)稳定表达的重组腺病毒载体,为将来的肝纤维化基因治疗提供基础.方法将IL-10cDNA克隆于腺病毒穿梭质粒PAdTrack-CM...
目的:建立小鼠Stra8基因启动子控制绿色荧光蛋白EGFP表达(P(stra8)-EGFP)的逆转录病毒包装细胞株,以方便地将P(stra8)-EGFP转导到目的细胞,为生殖细胞鉴定分选提供基础.方法...
目的 构建携带人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的重组慢病毒载体,并鉴定其在HeLa细胞中的表达.方法 采用Gateway技术使克隆载体pENTR221-hTERT与慢病毒表达载体pLenti6.3/...
目的:构建人端粒酶逆转录酶组分(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)反义cDNA逆转录病毒载体,观察其对大肠癌细胞HT29端粒酶活性和细胞增殖的抑...
本研究旨在构建ha1基因慢病毒载体并获得稳定的产毒细胞,为进一步研究异基因造血干细胞移植后ha1介导的GVHD和GVL的分离机制奠定基础.将已构建好的T-ha1质粒酶切获得目的基因后,将目的基因定向克...