Cinétique et modélisation de la production de pénicilline acylase par Escherichia coli recombinée sur milieu complexe

Not availableLes progrès réalisés en biologie moléculaire et plus particulièrement dans l'expression des gênes hétérologues chez les bactéries ont permis d'exploiter les microorganismes recombinés pour la production industrielle de protéines. La souche d'E. coli étudiée contient un plasmide dans lequel le gêne de la pénicilline acylase (PA) a été cloné. La PA immobilisée est utilisée pour la production industrielle d'acide 6-aminopénicillanique (intermédiaire clé dans la production des pénicillines semi-synthétiques). Nous avons étudié et modélisé le comportement de cette souche cultivée sur un milieu complexe, contenant du glucose, de l'acide phénylacétique et une source organique complexe (peptone, extrait de levure). Apres avoir déterminé les conditions de culture favorables à la production de PA, nous avons étudié l'influence du plasmide sur le comportement de la souche hôte. Pour cela nous avons comparé des paramètres cinétiques (vitesses spécifiques et rendements) entre la souche sauvage et recombinée. Ensuite, des cultures discontinues, semi-continues et continues ont été réalisées. Nous avons comparé les performances de la souche entre ces trois modes de culture, et analysé les cinétiques de croissance, de consommation des substrats et de production de PA afin de comprendre le comportement de la souche. A partir de ces informations, un modèle non structure a été élaboré. Il permet de modéliser dans les trois modes de culture, la croissance, les consommations successives des différentes sources carbonée et azotée, ainsi que la production de l'enzym