Chestnut Blight in Trás-os-Montes region (Portugal): Current incidence and Cryphonectria parasitica population study for introduction of Biological control by hypovirulence

O castanheiro europeu (Castanea sativa Mill.) é a árvore central de um sistema agroflorestal extensivo e multifuncional muito característico das montanhas do nordeste de Portugal. A introdução do fungo Cryphonectria parasitica (Murrill) Barr que provoca no castanheiro cancros nos tecidos corticais é desde a sua introdução, em 1989, a principal causa de morte do castanheiro. Não existindo meios de luta eficazes a remoção dos cancros é utilizada para reduzir o inóculo do parasita. O método evidenciou pouca eficácia e a doença está presente em todas as regiões de castanheiro. A Hipovirulência, mediada pela presença do hipovírus CHV1, é um método muito eficaz para o tratamento dos cancros e recuperação dos castanheiros. Foi objetivo deste trabalho avaliar a estrutura da população de C. parasitica para introduzir a Hipovirulência. Em 3 freguesias, onde a doença está presente desde a sua introdução, foi estudada a estrutura populacional do fungo parasita. Numa malha geográfica de 500x500m, 70 pontos de amostragem e 1331 castanheiros foram estudados. A análise geoestatística revelou focos de grande intensidade da doença que variaram de 54,75 a 73,33%. Foram identificados 5 vc types. EU-11 é o grupo dominante com 85,55%, seguido do EU01 (5,34%), EU66 (4,58%) e EU12 (2,90%), considerados novas introduções do parasita. O idiomorfo MAT-1 e MAT-2 estão presentes nas populações estudadas, sendo o MAT-2 dominante. A proporção 1:1 identificada, num dos locais, sugere multiplicação sexuada do fungo. A ainda baixa diversidade vc type na população de C. parasitica aconselha a introdução da Hipovirulência como meio de luta preferencial contra o Cancro do Castanheiro em Portugal.Chestnut (Castanea sativa Mill) is an ancient and low input agroforestry system of the Portuguese Northeast Mountains. Chestnut Blight that triggered a disturbing epidemics, which became a major cause of chestnut tree mortality after its establishment in 1989, is associated with Cryphonectria parasitica (Murrill) Barr, an invasive alien aggressive plant pathogens. Disease control is attempted by canker removal which was not efficient and disease has continuously increase and spread. Biological control by hypovirulence, a hypovirus CHV1 mediated system, is an efficient method to control the disease and improve the host plant recovery. The main goal of this work was obtaining, the rational for applying hypovirulence to control Chestnut Blight in Portugal. In three parishes, where the chestnut blight is present since its introduction, and applying the georeferencing methods the spread and the genetic population structure of C. parasitica was evaluated. In a 500x500m geographic grid, 70 sampled points and 1331 trees were evaluated. The geostatistical analysis showed widespread distribution of the disease with outbreaks with high incidence of the disease varying from 54.55% to 73 33%. Overall, five vc types were found. EU-11 is the dominant vc type comprising 85.50% of the isolates, followed by EU01 (5.34%), EU66 (4.58%) and EU12 (2.90%), that were considered new introductions of the parasite. MAT-1 and MAT-2 were identified in all study sites. MAT-2 is dominant but in one location near 1:1 that configure sexual reproduction. The still low diversity of vc type in the C. parasitica population recommend hypovirulence introduction as a preferential mean to control Chestnut Blight in Portugal.El castaño (Castanea sativa Mill.) es el árbol central de un sistema agroforestal multifuncional muy característico de las montañas del nordeste de Portugal. La introducción del hongo Cryphonectria parasitica (Murrill) Barr, que causa los chancros en el tejido cortical, es desde su introducción en 1989, la principal causa de muerte de los castaños. En ausencia de medios de control eficazes la eliminación de los chancros se utiliza para reducir el inóculo del parásito El método demostró poca efectividad y la enfermedad está presente en todas las regiones de la castaña de Portugal. El hipovirulencia, mediada por la presencia de virus CHV1 (dsRNA) es un método muy eficaz para el tratamiento de los chancros y la recuperación de los castaños. Este estudio tuvo como objetivo evaluar la estructura de la población C. parasitica para aplicar la hipovirulencia. En tres lugares, donde la enfermedad está presente desde su introducción, se estudió la estructura poblacional del hongo parásito. Usando una malla geográfica de 500x500m, se estudiaron 70 puntos de muestreo y 1331castaños. El análisis geoestadística reveló focos de alta intensidad de la enfermedad que van desde 54,75 a 73,33%. Se identificaron 5 vc. types. EU-11 és el grupo dominante con 85,55%, seguido por el EU01(5,34%), EU66(4,58%) y EU12(2,90%). Los idiomorfos MAT-1 y MAT-2 están presentes en las poblaciones estudiadas y la MAT-2 és dominante. La proporción 1:1 se identificó lo que indica la multiplicación sexual del hongo. La baja diversidad vc type en la población de C. parasitica recomienda la introducción de hipovirulencia para controlar el chancro del castaño en Portugal.Este estudo foi financiado pela FCT e programa COMPETE através do projeto PTDC/AGR-PRO/4606/2012 –“HiCC – Luta Biológica por Hipovirulência contra o Cancro do castanheiro em Portugal”.