OPTIMASI PRODUKSI DAN KARAKTERISASI ENZIM ??-AMILASE DARI ISOLAT BAKTERI TERMOFIL Bacillus sp RSSII4B SUMBER AIR PANAS LEJJA SOPPENG SULAWESI SELATAN

ABSTRAK\ud \ud Enzim ??-amilase adalah enzim ekstraseluler dan bersifat termostabil yang berfungsi menghidrolisis ikatan 1,4-??-glikosida pada pati secara acak menghasilkan glukosa, maltosa dan unit maltotriosa. Enzim ini banyak dimanfaatkan dalam teknologi bioproses. Pada penelitian ini dilakukan optimasi dan karakterisasi enzim ??-amilase dari isolat bakteri Bacillus sp RSSII4B bersumber dari air panas Lejja Soppeng Sulawesi Selatan, optimasi produksi enzim ??-amilase dengan menentukan konsentrasi substrat pati sagu, konsentrasi CaCl2 dan waktu fermentasi. Pemurnian dilakukan dengan fraksinasi enzim dari ekstrak kasar menggunakan metode salting out dengan penambahan amonium sulfat pada tingkat kejenuhan 0-20%, 20-40%, dan 40-60%. Karakterisasi enzim ??-amilase digunakan dengan variasi pH, suhu, substrat optimum, stabilitas pH dan suhu. Aktivitas enzim ditentukan dengan metode DNS, menggunakan maltosa sebagai standar. Kadar protein ditentukan berdasarkan metode Lowry menggunakan BSA (Bovine Serum Albumin) sebagai standar. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kondisi optimum produksi enzim ??-amilase dari isolat RSSII4B yaitu konsentrasi pati substrat (2,5%), konsentrasi CaCl2 (0,16%) dan waktu fermentasi (25 jam). Aktivitas enzim ??-amilase tertinggi pada fraksi amonium sulfat kejenuhan 20-40% dengan aktivitas spesifik sebesar 363,02 mU/mg. Tingkat kemurnian 2,2 kali lebih besar dari ekstrak kasar enzim, dan memiliki karakteristik enzim ??-amilase diperoleh pH optimum 6,0; suhu optimum 55oC konsentrasi optimum substrat 2,5%, stabil dan aktif sampai menit ke-90 pada suhu 55oC dan suhu 60oC. \ud \ud Kata kunci: enzim ??-amilase, isolat RSSII4B, aktivitas enzi