Further characterization and determination of the single amino acid change in the tsI138 reovirus thermosensitive mutant

Many temperature-sensitive mutants have been isolated in early studies of mammalian reovirus. However, the bio- logical properties and nature of the genetic alterations remain incompletely explored for most of these mutants. The mutation harbored by the tsI138 mutant was already assigned to the L3 gene encoding the l1 protein. In the present study, this mu- tant was further studied as a possible tool to establish the role of the putative l1 enzymatic activities in viral multiplication. It was observed that synthesis of viral proteins is only marginally reduced, while it was difficult to recover viral particles at the nonpermissive temperature. A single nucleotide substitution resulting in an amino acid change was found; the position of this amino acid is consistent with a probable defect in assembly of the inner capsid at the nonpermissive temperature.Plusieurs mutants thermosensibles ont été rapidement isolés dès le début de l’étude du réovirus de mammifères. Cependant, les propriétés biologiques et la nature des changements génétiques demeurent peu connues pour la plupart de ces mutants. La mutation au sein du mutant tsI138 a déjà été localisée comme étant présente sur le gène L3 codant pour la protéine l1. Dans la présente étude, ce mutant a été étudié davantage comme outil possible pour établir le rôle des poten- tielles activités enzymatiques de l1 dans la multiplication virale. Il a été observé que la synthèse des protéines virales est peu affectée alors qu’il est difficile de récupérer des particules virales à température non permissive. La substitution d’un seul nucléotide, entraînant le changement d’un acide aminé, a été retrouvée; la position de cet acide aminé est compatible avec un défaut probable d’assemblage de la capside interne à la température non permissive.Conseil de recherches en sciences naturelles et en génie du Canad