Fuktionsanalyse von Xenopus NumbL in der primären Neurogenese

Mitglieder der Numb Protein-Familie in Vertebraten haben vielfältige Funktionen während der frühen Embryogenese, einschließend einer essentiellen Rolle in der Entwicklung des Nervensystems. Numb Proteine interagieren als Gerüst-Proteine mit vielen Interaktionspartnern und können demnach mehrere Funktionen haben, wie zum Beispiel die Inhibition des Notch Signalweges. Die exakte Funktion während der Entwicklung in Vertebraten ist jedoch unklar. Im Gegensatz zu Numb wird NumbL ist ausschließlich im entstehenden Nervensystem von Xenopus exprimiert und wird durch die proneuralen Faktoren der Neurogenin Familie induziert und durch Notch inhibiert. Während die Überexpression von NumbL zu einer leichten Zunahme postmitotischer Neuronen führt, inhibiert ein Knockdown von NumbL alle molekularen Marker stromabwärts von Neurogenin und führt zu einer Zunahme von Vorläufer-Markern. Weiter werden in dieser Arbeit Beweise für die Interaktion von NumbL mit dem endocytotischen AP-2 Komplex erbracht und das diese Interaktion essentiell für die Funktion von NumbL während der primären Neurogenese ist. Interessanterweise scheint die Inhibition der Neurogenese bei einem Knockdown von NumbL nicht auf einer Deregulierung des Notch Signalweges zu beruhen.Members of the vertebrate Numb family of cell fate determinants have been shown to play multiple roles throughout early embryogenesis including an essential role during the development of the nervous system. The Numb proteins interact with multiple binding partners and correspondingly exhibit multiple functional activities such as the inhibition of the Notch pathway. However, the molecular mechanism of action during vertebrate development remains unclear. NumbL, but not Numb, is expressed in the areas of primary neurogenesis of Xenopus and is found to be positively regulated by the Neurogenin proneural factors and negatively by Notch. While overexpression of NumbL results in a mild increase in differentiated neurons, the knockdown of NumbL leads to a loss of proneural markers downstream of Neurogenin and increases neural progenitor markers. Furthermore, this thesis work provides evidence that NumbL interacts with the AP-2 complex and that this interaction is required for NumbL function during primary neurogenesis. Interestingly, the inhibition of neurogenesis in the absence of NumbL appears not to be the consequence of an increase in the inhibitory Notch signalling pathway