Effect of epidermal growth factor (EGF) during oocyte maturation on in vitro production of bovine embryos

El objetivo de este experimento fue investigar el efecto del Factor de Crecimiento Epidermal (EGF), durante la maduración in vitro (MIV) de oocitos bovinos, sobre el desarrollo embrionario in vitro. Los oocitos fueron obtenidos por aspiración de ovarios provenientes de vacas de matadero. Se seleccionaron 163 complejos oocitos-cumulus (COC´s), con tres o más capas de células de la granulosa y fueron incubados durante 24 horas en medios de maduración ovocitaria (OMM) químicamente definidos, con los siguientes tratamientos: 1) OMM modificado (T1); 2) OMM modificado suplementado con 10 ng/ml de EGF (T2); 3) OMM modificado suplementado con suero fetal bovino al 10% (T3). Luego de la MIV, en cada medio, los oocitos fueron incubados con espermatozoides (2 x 10^6/ml), durante 18 horas. Los oocitos fecundados fueron denudados y cultivados in vitro hasta el estadio de blastocistos. Los oocitos madurados en T2 y T3, presentaron una tasa de división similar, pero significativamente mayor que los madurados en T1 (P<0,05). La tasa de desarrollo hasta el estadio de blastocisto fue similar en los oocitos madurados en T2 y T3. Los oocitos madurados en T3 mostraron una mayor tasa de desarrollo hasta blastocisto en comparación con T1 (P<0,01). EGF en medios químicamente definidos induce una tasa de división y desarrollo hasta blastocisto similar a la obtenida con suero fetal bovino al 10%, representando una alternativa en la maduración de oocitos para la producción in vitro de embriones bovinos.162 - 167hjhernan@cantv.netBimestralThe aim of this experiment was to research the effect of Epidermal Growth Factor (EGF) during in vitro maturation (IVM) of bovine oocytes on the development of bovine embryos in vitro. The oocytes were recovered from ovaries of slaughtered cows. An IVM media containing serum was compared with chemically defined medias. As a result, 163 Cumulus oocyte complexed (COC´s)were selected , with three or more layers of granulosa cells, and were incubated for 24 hours in one of the three maturation medias: 1) Modified OMM (T1); 2) Modified OMM supplemented with 10 ng/ml of EGF (T2); 3) Modified OMM supplemented with 10% of fetal bovine serum (T3). Following IVM, COC´s were inseminated with 2x10^6 spermatozoa / ml. After 18 hours of gamete coincubation, presumptive zygotes were denuded and placed in culture until the blastocyst stage. Cleavage rates were similar in T2 and T3, but significantly greater than in T1 (P<0.05). Addition of EGF during in vitro maturation (T2) did not yield more blastocyst compared to the other treatments. None the less, T3 (with serum) had a greater yield of blastocysts compared with T1 (P