Extender composition and osmolality affects post-thaw motility and velocities of piracanjuba Brycon orbignyanus (Valenciennes, 1850) (Characiformes) sperm

Abstract: The aim of this study was to evaluate the effects of extender composition and osmolality on post-thaw motility of Brycon orbignyanus sperm. Eight extenders comprising combinations of two compositions (NaCl and glucose) and four osmolalities (285, 325, 365 and 405 mOsm kg -1) were tested. Methyl glycol was used as cryoprotectant. Diluted sperm was loaded into 0.25 ml straws, frozen in a nitrogen vapor vessel (dry shipper) and stored in a liquid nitrogen vessel. Straws were thawed in a water bath at 60°C for 3 s and sperm was immediately evaluated for motility rate and velocities (curvilinear = VCL; straight line = VSL; average path = VAP). Seminal plasma osmolality was also determined (249 mOsm kg -1). Both extender composition and osmolality affected post-thaw sperm motility. In general, sperm cryopreserved in NaCl was of better motility than that in glucose, and at lower osmolalities better than at higher ones. High post-thaw quality, with motility above 60% and VCL above 140 lm s _1, was observed only in samples frozen in NaCl at 285 mOsm kg -1. Different from most of the sperm from freshwater species that need a cell membrane protector (such as sugars), B. orbignyanus sperm should be frozen in an ionic solution for better protection during freezing and thawing processes. Furthermore, this solution should be prepared at an osmolality just above seminal plasma osmolality. Cryopreserved sperm can be used both for aquaculture purposes and for conservational programs, since B. orbignyanus is a threatened species. Resumen: El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la composición y osmolalidad del diluidor en la motilidad espermatica pos descongelación del semen de Brycon orbignyanus. Ocho diluidores comprendiendo la combinación de dos composiciones (NaCl y glucosa) y cuatro osmolalidades (285, 325, 365 and 405 mOsm kg -1) fueron evaluados. El metilglicol fue usado como crioprotector. El semen diluido fue envasado en pajillas de 0,25mL, congelado en tanque de vapor de nitrógeno (dry shipper) y almacenado en tanque de nitrógeno liquido. Las pajillas fueron descongeladas en baño maria a 60°C por tres segundos y el semen fue inmediatamente evaluado en cuanto a tasa de movilidad y velocidades (curvilinear = VCL; linear = VSL y media = VAP). La osmolalidad del plasma seminal también fue determinada (249 mOsm kg -1). La composición y osmolalidad del diluidor afectaron la movilidad espermática pos descogelación. En general, el semen criopreservado en NaCl fue de mejor calidad que el semen criopreservado en glucosa, y a bajas osmolalidades mejor que las altas. La mayor calidad pos descongelación con movilidad encima de 60% y VCL encima de 140 μm s-1, fue observada solo en muestras congeladas en NaCl a 285 mOsm kg -1. A diferencia de la mayoría de los espermatozoides de especies de agua dulce que necesitan un protector de membrana celular (como los azúcares), el semen de B. orbignyanus debe congelarse en una solución iónica para una mejor protección durante los procesos de congelación y descongelación. Además, esta solución debe prepararse a una osmolalidad justo por encima de la osmolalidad del plasma seminal. Los espermatozoides criopreservados pueden utilizarse tanto para fines de acuicultura como para programas de conservación, ya que B. orbignyanus es una especie amenazada