Identification of diagnostic and prognostic markers in aggressive large B cell lymphoma

RESUMEN: El objetivo fundamental de la presente tesis es la identificación de marcadores biológicos de utilidad diagnóstica y pronóstica en Linfoma B Difuso de Célula Grande (LBDCG). Se identifican 2 proteínas de interés diagnóstico y pronóstico, GCET1 y PRDM1/Blimp1. La expresión inmunohistoquimica de GCET1 se restringe a neoplasias linfoides de línea B que muestran un estadio de diferenciación centrogerminal. La expresión de PRDM1/Blimp1 se encuentra en neoplasias que muestran diferenciación terminal, entre ellas el linfoma plasmablástico y un subgrupo de pacientes con LBDCG que, tras ser tratados con R-CHOP, muestran un curso clínico agresivo. Adicionalmente, se describe la identificación de un perfil de microARNs con valor pronóstico generado en una serie retrospectiva de 259 pacientes con LBDCG tratados de forma uniforme con la terapia estándar (R-CHOP). Para esto se ha cuantificado la expresión de un grupo seleccionado de estos microARNs mediante PCR cuantitativa a tiempo real a partir de ARN extraído de tejido diagnóstico fijado en formol e incluido en parafina (FFIP). Adicionalmente se aplican los marcadores previamente identificados a series de muestras de pacientes que presentan dos tipos de linfoma, el linfoma plasmablástico y el LBDCG asociado a EBV y edad avanzada y se realiza una correlación clínico-patológica.ABSTRACT: The aim of this thesis is the identification of diagnostic and prognostic markers in diffuse large B cell lymphoma (DLBCL). We identify two markers of diagnostic and prognostic value, GCET1 and PRDM1/Blimp1. The immunohistochemical expression of GCET1 is restricted to lymphoid B cell neoplasms in a germinal center B cell differentiation stage. PRDM1/Blimp1 expression is found in neoplasms in a terminal B cell differentiation stage such as plasmablastic lymphoma and a subgroup of DLBCL cases with an aggressive clinical course after R-CHOP. Adittionally we identify a microRNA profile with prognostic value, generated in a retrospective series of 259 patients with DLBCL treated uniformly with R-CHOP. For this outcome, a selected group of microRNAs has been quantified by RT-PCR using RNA from diagnostic FFPE tissue. Aditionally we apply the previously described immunohistochemical markers in series of cases of plasmablastic lymphoma and EBV positive large B cell lymphoma of the elderly and a clinico-pathological correlation is performed