The determination of seminal plasma alpha-tocopherol and retinol by liquid chromatography

Retinol a alfa-tokoferol patří mezi lipofilní antioxidanty. Vitamin E zabraňuje lipoperoxidaci membrán a chrání tak spermie před poškozením volnými radikály. Stanovili jsme hladiny vybraných retinolu a alfa- tokoferolu v seminální plazmě pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie s UV/Vis detekcí. Retinol a alfa-tokoferol byly separovány na koloně LiChroCART 250-4, Purospher STAR RP-18e, 5 mikro-m, opatřenou ochranou kolonou LiChroCART 4-4, Purospher STAR RP-18e, 5 mikro-m isokratickou elucí. Jako mobilní fáze byl použit 93,5 % ethanol ve vodě. S použitím vnitřních standardů - retinylacetátu a tokoferylacetátu. Hladina retinolu v seminální plazmě se pohybovala u všech pacientů v rozmezí 15,1 +- 6,4 nmol/l, u nekuřáců 15,3 +- 6,1 nmol/l a u kuřáků 14,9 +- 7,1 nmol/l. Hladina alfa-tokoferolu v seminální plazmě byla u skupiny všech pacientů v rozmezí 1,90 +- 0,40 ?mikromol/l, u skupiny nekuřáků 1,93 +- 0,45 mikro-mol/l a u kuřáků 1,86 +- 0,29 mikromol/l.Retinol and alfa-tocopherol are lipofilic antioxidants. Vitamin E inhibits lipoperoxidation of cell membrane and safe spermatozoa before damage of free radicals. We have measured the levels of retinol and alfa-tocopherol in seminal plasma by HPLC with UV/Vis detection. Retinol and alfa-tocopherol were separed on a column LiChroCART 250-4, Purospher STAR RP-18e, 5 mikro-m fitted guard column LiChroCART? 4-4, Purospher STAR RP-18e, 5 mikro-m with isocratic elution. Mobile phase was 93.5 % ethanol. The retinylacetate and alfa-tocopherylacetate were used as internal standards The levels of retinol in seminal plasma were: all patients 15.1 +- 6.4 nmol/L, nonsmokers 15.4 +- 6.1 nmol/L and smokers 14.9 +- 7.1 nmol/L. The levels of alfa-tocopherol in seminal plasma were: all patients 1.90 +- 0.40 mikromol/L, nonsmokers 1.93 +- 0.45 mikromol/L and smokers 1.86 +- 0.29 mikromol/L.Katedra biologických a biochemických věd1. Prezentace výsledků diplomové práce 2. Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce 3. Diplomantka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k D