Possibilities of combination of Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography and lipophilic separation mechanism in liquid chromatography of naturally occuring polar compounds

Kapalinová chromatografie hydrofilních interakcí (Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography, HILIC) je speciální případ chromatografie s normálními fázemi. Vyznačuje se použitím polární stacionární fáze, která je typická pro chromatografii v systému s normálními fázemi, a vodně ? organické mobilní fáze s vysokým obsahem organických rozpouštědel (acetonitril), jež je typická pro chromatografii s obrácenými fázemi. Tato metoda je vhodná pro separaci polárních a hydrofilních látek. Předložená diplomová práce se zabývá využitím HILIC metody pro sledování chování fenolických kyselin a flavonů při různých podmínkách. Pro tyto separace byla použita komerčně dodávaná kolona ZIC-HILIC, která obsahuje zwiteriontovou stacionární fázi. Jako mobilní fáze byla použita směs pufru a acetonitrilu. Výsledkem práce je popis závislostí chromatografického chování studovaných látek v závislosti na složení mobilní fáze a využití těchto závislostí pro navržení podmínek separace. Metoda byla aplikována také na analýzu polárních látek ve vzorku piva, vína, ovocného čaje a džusu.Hydrophilic interaction liquid chromatography (HILIC) is a special type of normal-phase liquid chromatography. In the HILIC, polar stationary phases which are typical for normal-phase liquid chromatography are used together with an aqueous-organic mobile phases rich in organic solvents (usually ACN) typical for reversed-phase liquid chromatography. HILIC is suitable technique for separation of polar and hydrophilic compounds. This thesis deals with the investigation of retention behaviour of phenolic acids and flavones in different condition in the HILIC mode. The commercial ZIC-HILIC column with the zwitterionic stationary phase was used for the separation. The mixture of buffer and acetonitrile was used as the mobile phase. The dependences of compounds retention on different mobile phase composition were performed. The optimal condition for the separation was proposed. The method was applied to the analysis of polar compounds in beer, wine, fruit tea and juice.Katedra analytické chemieStudentka přednesla obhajobu své diplomové práce a zodpověděla dotazy oponenta a členů komise.Dokončená práce s úspěšnou obhajobo