Effetto antitumorale di due nuovi inibitori della tirosina chinasi (CLM3 e CLM29) in cellule primarie di carcinoma dedifferenziato della tiroide

Il carcinoma papillare dedifferenziato è una delle forme tumorali più aggressive, accompagnata da espansione metastatica e perdita della capacità di captare iodio, rendendo questo tumore sia resistente alle modalità terapeutiche tradizionali sia al trattamento con radioiodio. Lo scopo della tesi è stato l’allestimento delle colture cellulari primarie da carcinoma papillare dedifferenziato tiroideo ed è stata testata l'attività antitumorale di due nuovi composti, pirazolo [3,4-d] pirimidina (CLM3 e CLM29), al fine di valutarne l'effetto antiproliferativo. CLM3 e CLM29 inibiscono diversi target, tra cui la tirosina chinasi RET, il recettore del fattore di crescita endoteliale vascolare (VEGFR) e mostrano inoltre, effetto antiangiogenico. Sono stati prelevati tessuti tiroidei da cinque pazienti affetti da carcinoma papillare tiroideo, sottoposti nuovamente ad intervento chirurgico, da cui sono state ottenute colture cellulari primarie. I nuovi farmaci, pirazolo [3,4-d] pirimidina (CLM3 e CLM29), sono stati testati in saggi proliferativi (WST-1), apoptosi e migrazione. Le concentrazioni di CLM3 e CLM29 utilizzate negli esperimenti in vitro sono state 1, 10, 30 e 50 μM. I risultati hanno dimostrato un'evidente riduzione della proliferazione del 12% con CLM3 alla concentrazione di 10 μM (il composto più potente), del 43% con CLM3 30 μM e del 60% con CLM3 50 μM, sottolineando l'efficacia terapeutica di questi nuovi composti. Inoltre, CLM3 e CLM29 hanno incrementato la percentuale di cellule in apoptosi in maniera concentrazione-dipendente (P< 0.001) ed hanno inibito la migrazione (P< 0.001). Con questo lavoro di tesi si vuole dunque evidenziare l'attività antitumorale dei due nuovi composti in vitro, pirazolo [3,4-d] pirimidina (CLM3 e CLM29), dando l'avvio ad una futura valutazione clinica