ОПРЕДЕЛЯНЕ А ЕКСПРЕСИЯТА НА ФОСФАТИДИЛСЕРИН ПРИ СПЕРМАТОЗОИДИ В РАННА АПОПТОЗА ЧРЕЗ ФЛУОРЕСЦЕНТНО БИЛЯЗАН АНЕКСИН V

Double staining kit of Annexin V Cy3.18/6-CFDA was used to investigate the changes in phospholipide asymmetry after treating sperm cells with dexamethasone. The % of spermatozoa with registered translocation of PS in treated with dexamethazone groups at the 10-th min and in control no treated varied from 2.74%±0.65 to 2.30%±0.89. After the 5 hour of incubation these % increased to 39.83±3.33 for the treated group and 23.44±1.12 for the control. It was concluded that Annexin V binding assay is more sensitive in the detection of deterioration in membrane function than other conventional methods such as motility analysis and supravital techniques.Приложен е кит за двойно оцветяване с Анексин V Cy3.18 и 6-CFDA, даващ възможност за диференциране на апоптични от мъртви клетки. Процентът сперматозоиди с регистрирана експресия на ФС при свежи нетретирани сперматозоиди – контролна проба и експериментални, третирани с дексаметазон на 10-тата минута, варира от 2.30%±0.89 до 2.74%±0.65. След съхранение, на 5-я час този процент нараства до 23.44±1.12 за контролата и до 39.83±3.33 за опитната група. С настоящето изследване се доказва, че Анексин V теста е по-чувствителен за определяне промените в ПМ, в сравнение с конвенционалните методи на изследване за подвижност и преживяемост на сперматозоидите