Participación de dni1+, dni2+ y prm1+ en la fusión celular durante la conjugación

Memoria presentada por la licenciada María de los Ángeles Curto Borrego para optar al grado de Doctor en Biología, y que ha sido realizada en el Instituto de Biología Funcional y Genómica, centro mixto de la Universidad de Salamanca (Departamento de Microbiología y Genética) y el Consejo Superior de Investigaciones Científicas.La membrana plasmática forma la barrera que rodea a las células y consiste en una bicapa de fosfolípidos en la que se intercalan proteínas. Se trata de una estructura dinámica y no homogénea en la que sus componentes se encuentran en continuo movimiento. Dentro de la membrana coexisten distintos microdominios que se caracterizan por tratarse de regiones con características físicas diferentes a las de la membrana contigua. Difieren tanto en su composición como en la función específica que desempeñan. Las membranas biológicas pueden fusionarse generando una estructura continua y participando por tanto en multitud de procesos como la exocitosis, la formación de sincitios o la infección por virus. Para que dos membranas se puedan fusionar necesitan incorporar proteínas que regulen tanto la proximidad y curvatura, como la remodelación y cambios en la composición. El citoesqueleto de actina es esencial para la fusión de diversos tipos celulares como los osteoclastos, mioblastos y los gametos de levaduras (denominados shmoos). La conjugación en Schizosaccaromyces pombe es el proceso mediante el cual dos shmoos se fusionan para dar lugar a un zigoto diploide. Constituye un modelo de fusión celular para el estudio de nuevas proteínas que intervienen en dicho proceso, así como para dilucidar sus mecanismos de funcionamiento y de regulación. Las claudinas son proteínas con cuatro dominios transmembrana, con los extremos N y C intracelulares. Forman parte de las uniones estrechas, estructuras que crean poros con una permeabilidad selectiva en las células epiteliales limitando el movimiento de material a través del espacio paracelular. Adicionalmente pueden restringir la difusión de lípidos y proteínas en la membrana plasmática. Los genes dni1+ y dni2+ de S. pombe codifican proteínas con similitud a claudinas y que intervienen en la fusión de shmoos. Su expresión aumenta considerablemente en los primeros estadíos de la conjugación. Por otro lado, la expresión del gen prm1+ también se incrementa en el mismo estadío y su homólogo en Saccharomyces cerevisiae es necesario para una correcta fusión celular durante conjugación.Esta Tesis Doctoral se ha realizado gracias a una beca predoctoral del Programa de Formación del Profesorado Universitario (2011/2015) del Ministerio de Educación, Cultura y Deporte del Gobierno de España, proyectos del Plan Nacional de I+D (MICINN/Programa FEDER: BFU2007-61866, y BFU2010-15085) (MINECO/Programa FEDER: BFU2013-48583-C2-2-P) y proyectos de la Junta de Castilla y León GR231 y SA073U14.Peer Reviewe