Evaluation of cytochrome P450 2E1 activity in primary cultures of hepatocytes

Tato práce byla zaměřena na zavedení metody stanovení aktivity enzymu cytochrom P450 2E1 v primárních kulturách hepatocytů potkana a myši pomocí enzymatické přeměny substrátu p-nitrofenolu na p-nitrokatechol. Ke zjištění optimální koncentrace p-nitrofenolu pro stanovení aktivity cytochromu P450 2E1 bylo nejprve nutno zjistit, zda p-nitrofenol nevykazuje toxické účinky na hepatocyty v primární kultuře. Míra poškození hepatocytů in vitro byla hodnocena pomocí aktivity laktátdehydrogenázy v kultivačním médiu a aktivity celulárních dehydrogenáz (WST-1 test).This work was focused on introduction of method for evaluation of cytochrome P450 2E1 activity in primary cultures of rat and mouse hepatocytes by enzymatic conversion of the substrate p-nitrophenol to p-nitrocatechol. To find the optimal concentration of p-nitrophenol for evaluation of cytochrome P450 2E1 activity was necessary to exclude the potential toxic effect of p-nitrophenol on hepatocytes in primary culture at first. Parameters of hepatocyte damage in vitro were determined by lactate dehydrogenase activity in the culture medium and activity of cellular dehydrogenases (WST-1 test).Fakulta chemicko-technologická\par{1. Prezentace výsledků diplomové práce.\par} \par{\par{2. Diskuze k posudku vedoucího a oponenta diplomové práce.\par} \par{3. Studentka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k DP.\par}\par