Expression of cellular transporters of water and monosaccharides in the uterus and the placental transference zone in different gestational and non-gestational phases in the queen

Departament responsable de la tesi: Departament de Medicina i Cirurgia AnimalsLa placenta está considerada como el órgano principal encargado del transporte de solutos y nutrientes entre madre y feto. Por su característica función, durante la gestación, tanto el útero como la placenta sufren diversos cambios estructurales para la preparación del endometrio para la futura implantación y desarrollo fetal. El balance hidrológico y el metabolismo glucídico son mecanismos esenciales para la preparación del epitelio y del estroma para la implantación del embrión, estando también involucrados en el desarrollo fetal proporcionando una correcta nutrición al feto en desarrollo. Estos mecanismo son llevados a cabo mediante transportadores de agua denominados acuaporinas (AQPs) y transportadores de glucosa (GLUTs). Tanto las AQPs como los GLUTs han sido descritos ampliamente en el aparato reproductor femenino en una gran variedad de especies. Los objetivos de este estudio fueron: · Determinar la expresión y localización de las AQPs 1, 2, 3 y 8 además de los GLUTs 1 y 3 en el útero y la zona de transferencia placentaria de las gatas. · Determinar una posible correlación de estas proteínas con los niveles séricos de progesterona. · Determinar una posible correlación de estas proteínas entre ellas a diferentes fases sexuales y gestacionales. · Determinar variaciones en la actividad de la AQP2 durante la gestación de la gata mediante la evaluación de cambios en su fosforilación de residuos de tirosina. Las gatas se dividieron inicialmente en dos grupos: gestantes y no gestantes. Tras ello, las gatas gestantes se dividieron en 30, 40, 50 y 60 días de gestación según el diámetro de la vesicular embrionaria. Las gatas no gestantes se dividieron entre ovuladas y no ovuladas según sus niveles séricos de progesterona. Las biopsias realizadas de útero y zona de transferencia placentaria se evaluaron mediante técnicas de inmunoblotting e inmunohistoquímica. Las técnicas de inmunoblotting e inmunohistoquímica revelaron la expresión de las AQPs 1, 2, 3, 8 en las células epiteliales del endotelio laminar y glandular además de en la zona de transferencia placentaria durante las diferentes fases sexuales y gestacionales. Las AQPs 2, 3 y 8 se expresaron en las capas coriónicas, mientras que la AQP1 no mostró ninguna expresión en las células del córion, contrariamente a lo anteriormente descrito por otros autores. Estas AQPs no mostraron cambios estadísticamente significativos durante las diferentes fases sexuales y gestacionales. Sin embargo, se observaron cambios en la localización de las AQPs 2 y 8 relacionados con los niveles séricos de progesterona. Así, cuando los niveles de progesterona sérica eran bajos ( 2ng/ml), éstas acuaporinas se encontraron tanto en la membrana citoplasmática como repartidas por todo el citoplasma del epitelio laminar y glandular. Además, la actividad de las AQP2 no estaba regulada por la fosforilación de tirosina. Los GLUTs 1 y 3 también estaban presentes tanto en el epitelio laminar como en el epitelio glandular del endometrio y en las capas coriónicas de la zona de transferencia placentaria. No se encontraron cambios estadísticamente significativos en su expresión a lo largo de las distintas fases sexuales y gestacionales. Finalmente, la AQP2 mostró una correlación positiva y significativa con los niveles séricos de progesterona, mientras que la AQP1 y el GLUT3 mostraron una correlación negativa con los niveles de progesterona. Además, las AQPs 1 y 3 mostraron una correlación negativa y significativa entre ellas en todas las fases evaluadas. En conclusión, éste estudio confirma la presencia de las AQPs 1, 2, 3, 8 y de los GLUTs 1 y 3 en el endometrio y en la zona de transferencia placentaria de la gata a lo largo de diferentes fases sexuales y gestacionales como ha sido previamente descrito en otras especies a pesar de ciertas diferencias específicas