Caracterização química e molecular de espécies das famílias Lamiaceae e Apiaceae da flora aromática de Portugal

Tese de mestrado em Biologia (Biologia Celular e Biotecnologia) apresentada à Universidade de Lisboa através da Faculdade de Ciências, 2007In the past years chemical analyses and molecular markers have been used widely in the identification of cultivars and in the chemical and genetic relationship analyses of individuals and species contributing vastly for the evolutionary and ecological studies. This study aimed at a deeper research of some aromatic plants of the Portuguese flora, these included Thymus caespititius, Crithmum maritimum, Ammi huntii, Angelica lignescens, Melanoselinum decipiens and Chaerophyllum azoricum, carrying out a joint approach of the chemical composition of essential oils and the analysis of molecular markers. Chemical analyses of the essential oils of T. caespititius, C. maritimum and C. azoricum reinforced the results found in the literature. Although some plants, with distinctive geographic location, present quantitative variations in the chemical composition of the essential oils, these are not relevant for the separation of the individuals by place of harvest. In the essential oils of A. huntii the main components identified were dillapiol in the oils isolated from individuals harvested on São Miguel and trans-isomiristicin in the oils isolated from individuals harvested on São Jorge and Flores. In these samples a high chemical polymorphism was detected, allowing to consider the existence of two chemotypes, dillapiol/terpinolene/trans-α-bergamotene and trans-isomiristicin/limonene/ß-mircene. Chemical and molecular analyses allowed the distinction between individuals of A. lignescens from individuals of M. decipiens, revealing a separation in an inter-specific level corroborating the existence of two distinctive species, one endemic from Azores and the other endemic from Madeira. Molecular analyses of these species showed a high number of genetic polymorphisms (above 75%) amongst the several individuals of different species, allowing the distinction of the various individuals and the determination of the genetic relationships between them. Through this research a modeNos últimos anos, a análise química e os marcadores moleculares têm sido utilizados na identificação de cultivares e na análise de relações genéticas entre indivíduos e espécies, contribuindo, também, para estudos evolutivos e ecológicos. Com este trabalho pretendeu-se aprofundar o estudo de algumas plantas aromáticas da flora de Portugal, como Thymus caespititius, Crithmum maritimum, Ammi huntii, Angelica lignescens, Melanoselinum decipiens e Chaerophyllum azoricum, realizando uma abordagem conjunta da composição química e da análise de marcadores moleculares, A análise química dos óleos essenciais de T. caespititius, C. maritimum e C. azoricum permitiu corroborar dados anteriores existentes na bibliografia. Apesar de algumas variações quantitativas observadas na composição química dos óleos essenciais em plantas com localizações geográficas distintas, estas não foram relevantes na separação dos diferentes indivíduos em função do local de colheita. Nos óleos essenciais de A. huntii os componentes maioritários detectados foram o dilapiole, nos óleos isolados dos indivíduos de São Miguel e a trans-isomiristicina nos óleos isolados dos indivíduos de São Jorge e Flores. Nestas amostras foi detectado um elevado polimorfismo químico, levando a considerar a existência de dois quimiotipos, dilapiole/terpinoleno/ trans-α-bergamoteno e trans-isomiristicina/limoneno/ß-mirceno. As análises químicas e moleculares permitiram a distinção entre indivíduos de A. lignescens dos indivíduos de M. decipiens, relevando uma boa separação a nível inter-específico, corroborando a existência de duas espécies distintas, uma endémica das ilhas dos Açores (A. lignescens) e outra endémica da ilha da Madeira (M. decipiens). Através da análise molecular observou-se um elevado número de polimorfismos genéticos entre os diferentes indivíduos das diferentes espécies em estudo, superior a 75%, permitindo a distinção dos vári