Inhibition du protéasome dans des cellules de leucémies aiguës myéloïdes : apport des approches protéomiques

Le système ubiquitine protéasome joue un rôle important dans la régulation de nombreux processus cellulaires. L'inhibition du protéasome induit l'apoptose de nombreuses cellules tumorales, mais pas ou peu des cellules saines. Cependant, les mécanismes moléculaires précis mis en jeu restent à ce jour peu connus. L'objectif de mon travail de thèse était d'élucider ces mécanismes. Sur un modèle cellulaire de LAM arrêtées à différents stades de maturation, j'ai montré que le traitement par les inhibiteurs du protéasome conduit, contrairement aux agents cytotoxiques classiques, à un taux d'apoptose plus important des cellules les plus immatures. L'étude du contenu en protéasome de ces cellules montre que sa quantité et son activité diffèrent. Ces études ont été complétées par une analyse protéomique quantitative différentielle à grande échelle de type SILAC. Cette étude a conduit à l'identification de l'interleukine 32 et de la protéine SIVA qui varient uniquement dans les cellules KG1a, plus sensibles aux inhibiteurs du protéasome et qui pourraient être impliquées dans la réponse différentielle des cellules au traitement. Ces résultats ouvrent de nouvelles pistes et permettent d'envisager l'identification de nouvelles cibles pharmacologiques pour le traitement des leucémies.The ubiquitin-proteasome pathway plays a critical role in the regulated degradation of proteins involved in cell cycle control, signal transduction and tumor growth. Proteasome inhibitors possess potent antitumor activity against a broad spectrum of human tumor types. However, the effects at the molecular level of these compounds still have to be clearly determined. Our aim is to elucidate these mechanisms. We demonstrated that the proteasome status between KG1a and U937 cells differed. To go further into the understanding of the effect of proteasome inhibitors on these cell lines, we investigated their protein expression profile, before and after proteasome inhibition, using quantitative proteomic analyses based on SILAC labelling. We identified interleukin-32 and SIVA proteins in KG1a cells, which could play a putative role in differential apoptotic response in treatment by proteasome inhibitor