Cis- und trans-wirksame Elemente der latenten Replikation des Epstein-Barr-Virus

Die Replikation des Epstein-Barr-Virus (EBV) wird als Modellsystem für die chromosomale Replikation höherer Eukaryontenzellen angesehen. Die für die Replikation des Virus verantwortliche Einheit, der oriP, enthält drei Nonamersequenzen, die den Telomeren der Säugetierchromosomen homolog sind. Daraus wurde geschlossen, daß möglicherweise die Telomerase, die mit ihrer RNA-Untereinheit an Telomere zu binden vermag, eine wesentliche Rolle bei der Initiation der Replikation spielen könnte. Mittels Transfektion verschiedener Genexpressionsvektoren latenter Gene des EBV in unterschiedliche Zelllinien wurde untersucht, ob diese Gene die normalerweise strikt abgeschaltete Telomerase, die in durch EBV verursachten Tumoren sehr stark exprimiert wird, reaktivieren können. Dazu wurde nach Transfektion die Telomeraseaktivität durch einen TRAP-Assay, die -expression mittels RNase-Protection-Assay und die -promotoraktivität mit einem Luciferase-Assay gemessen. Eine Erhöhung dieser Parameter konnte nicht dargestellt werden, allerdings mögliche Vorstufen, die zur Immortalisierung führen können. Weiterhin wurde ein als funktionell beschriebenes neues Element am oriP, das rep*-Element, charakterisiert und mittels in-vivo-footprinting auf Funktionalität überprüft. Die Nichtbedeckung mit Proteinen macht eine funktionelle Rolle dieses Elements bei der Replikation allerdings unwahrscheinlich